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考马斯亮蓝g-250法测定蛋白质含量的原理是什么
在酸性条件下,考马斯亮兰g-250染料与蛋白质疏水区结合,导致da吸收峰由465 nm 变为595 nm,同时颜色也由棕色变为蓝色,该蓝色化合物颜色的深浅与蛋白质浓度的高低成正比关系。将蛋白质样品或稀释的bsa 与bradford试剂混合,测量在595 nm处的吸收值,在建立由一系列稀释的bsa建立的标准曲线的情况下,蛋白质的浓度可以根据标准曲线而确定。
考马斯亮蓝g-250(coomassie brilliant blue g-250)测定蛋白质含量属于染料结---的一种。在游离状态下呈红色,da光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm波长下有da光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝g-250结合在2min左右的时间内达到平衡,完成反应十分迅速;其结合物在室温下1h内保持稳定。
该法是1976年bradford建立,试剂配制简单,操作简便快捷,反应非常灵敏,灵敏度比lowry法还高4倍,可测定微克级蛋白质含量,测定蛋白质浓度范围为0~1 000μg/ml,xaio可测2.5μg/ml蛋白质,是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。
考马斯亮蓝有g250和r250两种。其---马斯亮蓝g250由于与蛋白质的结合反应十分迅速,常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝r250与蛋白质反应虽然比较缓慢,食用蓝色1号厂家,但是可以被洗脱下去,所以可以用来对电泳条带染色。


亮蓝为有金属---的浅紫色至古铜色颗粒物或粉末状,无臭。溶于于水,溶液呈亮蓝色;可溶精、---和凡士林。耐光性性、耐温性、耐碱性、耐盐性和耐微生物性---,食用蓝色1号批发,耐酸性和耐氧化还原反应特点。弱酸性时呈青色,强碱时呈黄色,在烧开溶液中呈蓝紫色。亮蓝的饱和度极强,一般全是与别的服用添加剂相互配合应用,使用量小,在0.0005%~0.01%中间。装饰艺术蔬菜水果、可可制品、巧克力朱古力制品(包含可可脂朱古力及制品)及其糖块(05.01.01可可制品、05.04装饰设计糖块、顶饰和甜汁以外)、点心上彩装。客户在应用本产品前要认真阅读gb2760<食用添加剂应用标准>,每个纯色种类的应用范畴和使用量会大不一样。
亮蓝(brilliantbluefcf)别称为食用青色1号(日),食用蓝色1号供应商,是由邻磺酸与n-,n-(3-磺基---)-缩合反应后空气氧化,利用当代的生物科技做成的食用合---色素。亮蓝是一种人造食用染剂,外型为红蓝紫色匀称粉末状或颗粒物,有金属---,无臭,盘锦食用蓝色1号,亮蓝具备酸性染料的特点,能使动物纤维着色。溶于于水(18.7g/100ml,21℃),呈绿色光深蓝色水溶液,溶精(1.5g/100ml,95%酒精,21℃)、凡士林、---。耐光性、耐温性强。对柠檬酸钠、酒石酸、碱均平稳、颜色艳丽、调色当然、着色力好、色彩不容易受ph危害。
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